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超氧陰離子檢測(cè)試劑盒計(jì)算公式和產(chǎn)品說明!

規(guī)格：50T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體100mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體32mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體25mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體25mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑四：lv仿，自備。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1 支，4℃保存。10μmol/mL 。

產(chǎn)品說明：
生物體內(nèi)超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號(hào)傳導(dǎo)的作用，但積累過多時(shí)會(huì)對(duì)細(xì)胞膜及生物大
分子產(chǎn)生破壞作用，導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞和組織代謝異常，從而引起多種疾病。

超氧陰離子與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2－，NO2－在對(duì)氨基苯磺酰胺和萘乙二胺鹽酸鹽的作用下，
生成紅色的偶氮化合物，在530nm 有特征吸收峰，根據(jù)A530 值可以計(jì)算樣品中O2－含量。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、水浴鍋、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿、lv仿和蒸餾水。

超氧陰離子檢測(cè)試劑盒計(jì)算公式和產(chǎn)品說明!

操作步驟：
一、超氧陰離子提取
1. 植物、動(dòng)物組織：稱取約0.1g 樣本，加入提取液1mL，充分研磨，12000rpm，4℃，離心20min，
取20μL 上清測(cè)定蛋白含量，其余上清作為待測(cè)樣本。
2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
取適量標(biāo)準(zhǔn)液，首先16 倍稀釋至0.625μmol/mL，然后進(jìn)行倍比稀釋至0.3125、
0.15625、0.078、0.039、0.0195、0.009765、0.0049、0.00244、0.0012、0.0006umol/mL 梯度稀釋
的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用0.3125、0.15625、0.078、0.039、0.0195、0.009765、0.00244、0.0006umol/mL
標(biāo)準(zhǔn)管做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3. 血清或培養(yǎng)液：直接測(cè)定。

超氧陰離子含量計(jì)算公式
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
以ΔA 標(biāo)準(zhǔn)為y 軸，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為x 軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線y=kx+b。
2.超氧陰離子含量的計(jì)算
將ΔA 樣品帶入方程得到x 值（μmol/mL）
（1）按照樣本質(zhì)量計(jì)算
超氧陰離子含量（μmol/g）= x×V 樣本÷（V 樣本÷V 提取×W）=x÷W。
超氧陰離子產(chǎn)生速率（μmol/ g·min）= x×V 樣本÷（V 樣本÷V 提取×W）÷T=0.05x÷W。
（2）按照蛋白質(zhì)濃度計(jì)算
超氧陰離子含量（μmol prot）= x×V 樣本÷（V 樣本×Cpr）=x÷Cpr。
超氧陰離子產(chǎn)生速率（μmol/ mg prot·min）= x×V 樣本÷（V 樣本×Cpr）÷T=0.05x÷Cpr。
(3) 血清或培養(yǎng)液
超氧陰離子含量（μmol/mL）= x
超氧陰離子產(chǎn)生速率（μmol/mL·min）= x÷T=0.05x。
V 樣本：參與反應(yīng)樣本體積，0.2ml；V 提取：提取過程中加入的提取液體積，1mL；Cpr：樣
本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，20min。
 

超氧陰離子(OFR)含量檢測(cè)試劑盒計(jì)算公式和產(chǎn)品說明!